最佳答案:链上的互补序列结合复性,温度条件55~68℃,保温一定时间(5~90秒);3.延伸,即逆转录酶催化RT引物延伸合成CDNA,形成RNA-DNA杂合双链,温度条件60~70℃,保温一定时间(60~180
循环反应:1.变性,即对待扩增的RNA模板加热变性,温度条件89~95℃,保温定时间(5~120秒);2.复性,即RT引物(用于RT过程中,与RNA链结合并能引导CDNA合成的DNA寡核苷酸)与RNA链上的互补序列结合复性,温度条件55~68℃,保温一定时间(5~90秒);3.延伸,即逆转录酶催化RT引物延伸合成CDNA,形成RNA-DNA杂合双链,温度条件60~70℃,保温一定时间(60~180秒);杂合双链变性解链后,RT引物再结合到RNA链上,由逆转录酶第二次催化引物延伸合成CDNA,如此,利用RNA模板,可以反复进行CDNA合成,因而,称之为循环逆转录(Cycle Reverse Transcription,CRT)。
这个不同温度持续时间,以实际逆转录反应不同而有所差异。